Caractérisation fonctionnelle de l'autolysine AtlA de Enterococcus faecalis et identification des facteurs modulant son activité enzymatique

Les bacteries synthetisent des hydrolases du peptidoglycane (PG), ou autolysines, dont l’activite doit etre finement regulee. Chez Enterococcus faecalis, une seule autolysine (AtlA) a ete decrite. Nous avons purifie AtlA et analyse les produits de digestion du PG par cette enzyme : AtlA est une N-acetylglucosaminidase. La presence du domaine N-terminal de AtlA n’a pas d’impact sur son activite enzymatique, celle du domaine LysM permettant la fixation au PG est cruciale pour l’activite. Nous avons purifie la proteine AtlA produite par E. Faecalis, quatre polypeptides majeurs ont ete identifies : la proteine mature, deux formes glycosylees et la proteine tronquee de son domaine N-terminal. Nous avons egalement initie une etude comparative de la susceptibilite de differentes souches de E. Faecalis a l’enzyme AtlA. La caracterisation du mutant oatA confirme que ce gene est responsable de l’O-acetylation du PG. L’absence de l’O-acetylation du PG chez le mutant oatA se traduit par une plus grande susceptibilite a l’enzyme AtlA. Ce resultat confirme que cette modification est un des mecanismes qui permettent a la bacterie de controler les activites autolytiques.