The effect of the chemically synthetic siRNA on the expression of NgR of primary cortical neuron in vitro

目的 筛选能有效抑制神经元NgR表达的siRNA序列.方法 根据siRNA靶序列设计原则,设计并化学合成针对大鼠NgR基因编码区的siRNA三对,并以一对无关序列的寡核苷酸作为阴性对照.原代培养的大鼠皮层神经元分为5组:siRNA-1组、siRNA-2组、siRNA-3组、无关序列组、非转染组,用阳离子脂质体TransMessenger Transfection Reagent转染.转染后48h行RT-PCR和免疫细胞化学检测NgR表达水平的变化.结果 转染48h后,与序列2、3和无关序列转染以及未转染的细胞相比,序列1转染的神经元NgR mRNA水平明显下降,并且其NgR抗体免疫荧光染色的荧光强度也明显减弱.结论 化学合成siRNA能有效地抑制原代皮层神经元NgR的表达。