Estudio del papel de la telomerasa en la transformación celular y caracterización de la heterocromatina telomérica de mamíferos

Transformacion de celulas humanas normales en ausencia de activacion de telomerasa. Durante la transformacion neoplastica, las celulas adquieren mutaciones geneticas que les permiten escapar de los mecanismos de control de la proliferacion celular. Celulas primaria murinas pueden ser transformadas en tumorales mediante la coexpresion de dos oncogenes cooperantes como c-myc y H-RasV12. Sin embargo, experimentos similares en celulas humanas no han tenido exito en la obtencion de celulas transformadas. Estas diferencias pueden atribuirse, al menos en parte, a las diferencias que existen entre celulas humanas y de raton en cuanto a su biologia telomerica. Mientras que celulas murinas expresan telomerasa y sus telomeros son extremadamente largos, las celulas humanas carecen de telomerasa y sus telomeros se acortan tras cada ciclo de division celular. Este acortamiento telomerico supone una barrera que limita la capacidad proliferativa de las celulas humanas. La importancia de la telomerasa en el proceso de conversion de una celula humana normal en tumoral se pone de manifiesto en que la mayoria de los tumores humanos presentan elevados niveles de actividad telomerasa. Los modelos existentes de obtencion de celulas humanas mediante la alteracion de elementos geneticos definidos incluian la activacion de un mecanismo de mantenimiento telomerico como un requisito necesario para la transformacion celular. En nuestro trabajo hemos descrito un modelo alternativo de transformacion celular que no requiere la activacion de telomerasa o de otro mecanismo alternativo de mantenimiento telomerico. Hemos demostrado que la sobreexpresion de E1A, MDM2 y H-RasV12 es suficiente para convertir fibroblastos humanos normales en celulas transformadas, es decir, capaces de crecer en ausencia de adhesion y de generar tumores al ser inyectadas en ratones inmunodeprimidos. No detectamos activacion de un mecanismo de mantenim