酵母双杂交诱饵载体pGBKT7-UL49的构建、表达与鉴定

目的构建人巨细胞病毒UL49基因的诱饵表达载体，以利于筛选与pUL49相互作用的蛋白。方法PCR扩增UL49全序列，克隆入pGBKT7，将构建好的pGBKT7-UL49转化到酵母细胞AH109；用蛋白印迹法分析诱饵蛋白的表达，检测诱饵蛋白有无毒性和自激活效应。结果克隆成功pGBKT7-UL49；pG—BKT7-UL49成功转化到AH109，转化细胞AH109[pGBKT7-UL49]表达诱饵蛋白pUL49，pUL49对转化细胞无细胞毒性、无自激活。结论成功构建了酵母诱饵表达载体pGBKT7-UL49，为进-步筛选与pUL49相互作用的蛋白提供了实验基础。