洋葱花发育C类MADS-box基因 AcAG 表达载体的构建及拟南芥转化

为分析洋葱 AcAG 基因(GenBank ID: JX974431)的功能，本研究根据课题组前期获得的洋葱C类MADS-box基因 AcAG 的cDNA序列设计特异引物，利用RT-PCR技术从洋葱花瓣中分离到了AcAG基因的全长CDS序列，连接到植物载体pCAMBIA1304中，构建超表达载体pCAMBIA1304-AcAG(+)。采用冻融法将重组植物表达载体转入到农杆菌菌株LBA4404中，并利用花序侵染法对野生型拟南芥进行遗传转化。经RT-PCR和酶切鉴定，结果表明， AcAG 过表达载体构建成功；转基因植株基因组PCR和RT-PCR分析结果表明，外源基因 AcAG 已经整合到拟南芥基因组中，并在转录水平上发生表达。