云南撒坝猪致病性大肠埃希菌外膜蛋白F(OmpF)缺失株的构建
2015
为了进一步评价E.coliOmpF的功能,我们构建了E.coli外膜蛋白F的缺失突变株。首先根据E.coliF-M-2的测序后的0mpF基因序列设计PCR敲除引物,引物5’端分别有50bp和48bp的拟敲除基因的同源臂,3’端为扩增引物,以pKD3为模板,扩增两侧含FRT位点的氯霉素抗性基因,然后利用pKD46的λ-Red重组系统替换E.coliF-M-2基因组上的0mpF基因,再利用表达FLP重组酶的质粒pCP20将FRT位点之间的氯霉素抗性基因删除,最后用鉴定引物进行鉴定并测序。结果成功地构建了云南撒坝猪致病性E.coli0mpF缺失突变株。
- Correction
- Source
- Cite
- Save
- Machine Reading By IdeaReader
0
References
0
Citations
NaN
KQI