Expansion massive de lymphocytes T CD8+ clonotypiques et polycytotoxiques au cours de la nécrolyse épidermique toxique ☆

Introduction La necrolyse epidermique toxique (NET) est une reaction cutanee medicamenteuse avec un taux de mortalite eleve (10–30 %) et caracterisee par un decollement bulleux du fait d’une necrose epidermique massive. Plusieurs etudes ont montre la presence d’un infiltrat cutane riche en lymphocytes cytotoxiques (T, NK) et en monocytes inflammatoires a la phase aigue de la NET. Materiel et methodes Dans cette etude, nous avons cherche a mieux caracteriser le phenotype des lymphocytes infiltrant la peau, a la phase aigue de 14 patients NET. A ce titre, nous avons analyse les cellules presentes dans les bulles par cytometrie en flux ou de masse et par sequencage nouvelle generation des recepteurs T (TCR). Resultats Nos resultats confirment que les lymphocytes T CD8+ conventionnels (CD45 + TCRαβ+CD8β+) et, a un moindre degre, les lymphocytes T CD4+ sont les principales sous-populations trouvees dans le liquide de bulle des patients NET. Nous avons observe une inversion du ratio TCD8/TCD4 dans les bulles (moyenne : 1,4) en comparaison a la peau de donneur sain (moyenne : 0,3). En outre, nous n’avons pas retrouve d’infiltration majeure de cellules NK (CD45 + TCRαβ+NKP46 + ) ou cellules NKT (CD45 + TCRαβ+TCRVα24 + ). L’analyse du repertoire des recepteurs T presents dans l’infiltrat cutane de 6 patients NET a mis en evidence un usage preferentiel de certaines chaines Vβ sur les lymphocytes T CD8+, correle avec une expansion massive de rares clones (apres analyse des boucles CDR3 caracterisees par sequencage). L’analyse par cytometrie de masse des cellules T CD8+ surexprimant certaines chaines Vβ dans le liquide de bulle a montre que ces cellules presentent essentiellement un phenotype effecteur memoire CD45RA-CD27+ et polycytotoxique avec co-expression de nombreux marqueurs de cytotoxicite : granulysine, granzyme B, granzyme A, perforine et TWEAK. De facon interessante, nous n’avons pas detecte de biais preferentiel dans le repertoire TCR des lymphocytes T infiltrant la peau de patients atteints de toxidermies moins severes (exantheme maculo-papuleux ou Dress), ni de phenotype polycytotoxique exprime par ces cellules. Conclusion Nos resultats mettent en evidence une expansion massive de lymphocytes T CD8+ clonotypiques et polycytotoxiques dans les cellules de bulles a la phase aigue de la NET. L’importance de cette expansion pourrait expliquer la severite de cette reaction mortelle.