Isolamento de Leveduras Presentes Naturalmente em Uvas Vitis Vinífera em Diferentes Meio de Cultura.

Existem varias tecnicas que permitem selecionar e isolar as cepas de leveduras a qual esta cada vez mais difundida, entre elas, os meios de culturas que possuem em sua formulacao nutrientes necessarios para os micro-organismos multiplicarem-se, permitindo seu estudo e caracterizacao. Na industria vinicola um dos avancos tecnologicos e o controle microbiologico do processo fermentativo por inoculacao de leveduras selecionadas de Saccharomyces cerevisiae. Usam-se as leveduras secas ativas que estao acessiveis com distintas propostas de uso na fermentacao, e com varias marcas a disposicao na industria enologica. O presente trabalho objetivou avaliar tres meios de cultura distintos quanto ao isolamento de leveduras provenientes de uvas oriundas de vinhedos localizados no municipio de Dom Pedrito, no qual pertence a regiao da Campanha Gaucha. Foram utilizadas uvas sas e maduras de castas tintas Vitis vinifera L., as quais foram coletadas em recipientes esterilizados e acondicionadas sob-refrigeracao ate a analise, no laboratorio de microbiologia da Universidade Federal do Pampa, Campus Dom Pedrito. As bagas foram cultivadas sobre os meios de cultura Agar Sabouraud dextrose (SB), Agar Potato dextrose 4% (PDA) e Agar extrato de levedura e dextrose (YEPD), incubadas a 25oC por cinco dias, quando fez-se a analise morfologica das colonias crescidas. Observou-se crescimento de colonias compativeis com leveduras apresentando coloracao entre o branco e o creme e textura cremosa na microscopia observaram-se estruturas unicelulares ovais e circulares com presenca ou nao de brotamento. Verificou-se que nao houve diferenca entre os meios de cultivo quanto ao numero de colonias isoladas, pois os tres apresentaram 56 colonias, no entanto observou-se diferenca entre os meios no que tange a intensidade de crescimento. Para mensuracao desses resultados foram atribuidos escores que variaram entre satisfatorio, regular e pouco satisfatorio, esses foram analisados levando em consideracao o crescimento das colonias nas placas. Com isso observou-se que no meio de cultivo PDA 96,4% (54/56) das colonias, no meio YEPD 60,71% (34/56), e no meio Sabouraud 51,7% (29/56), apresentaram crescimento leveduriforme satisfatorio cobrindo a totalidade do meio, enquanto os que obtiveram crescimentos pouco satisfatorios foram Sabouraud 41,07% (23/56), YEPD 21,42% (12/56) e PDA 1,8 % (1/56). Os meios de culturas sao formulacoes com nutrientes necessarios para que os micro-organismos possam se manter e multiplicar permitindo sua analise. Os meios utilizados apresentam altas concentracoes de acucares, porem com diferencas no Ph e em alguns constituintes podendo ter influenciado na intensidade do crescimento das colonias isoladas. Conclui–se que nao houve diferenca entre os meios de cultura quanto ao numero de isolamentos, no entanto, o meio Agar Potato Dextrose obteve colonias leveduriformes com maior intensidade de crescimento, quando comparado com os dois outros meios utilizados.