Dépistage rapide et confirmation du profil multitoxines des tétrodotoxines et de ses analogues dans les liquides biologiques

Objectif Nous presentons trois cas d’intoxication a un poisson tetrodontiforme, dont un mortel, survenus en Nouvelle-Caledonie. De plus, nous comparons les resultats des dosages urinaires des patients, obtenus d’une methode Elisa (habituellement utilisee dans le domaine alimentaire pour detecter la TTX et ses analogues) avec une methode LC-MS/MS. Methodes En aout 2014 sont survenus en Nouvelle-Caledonie, au sein d’une meme fratrie, trois cas d’intoxication au poisson-ballon, ayant entraine un deces au domicile et deux hospitalisations. La determination de la TTX dans l’urine, le serum ou le plasma des patients et du sujet decede a ete essentielle pour confirmer le diagnostic. En parallele, il a ete evalue l’utilisation d’un test immuno-enzymatique a base de maleimide (mELISA) pour la determination des concentrations urinaires en TTX. Resultats L’analyse LC-MS/MS a confirme la presence de TTX mais egalement d’analogues de la TTX (4-epiTTX, 4,9-anhydroTTX et 5,6,11-trideoxyTTX) dans l’urine, montrant une evolution du profil multi-toxines au cours du temps. Dans le plasma du sujet decede, l’analyse LC-MS/MS des echantillons a egalement revele la presence de TTX (32,9 ng/mL) et de 5,6,11-trideoxyTTX (374,6 ng/mL). Apres application des Toxicity Equivalency Factors (TEFs) [1] , la concentration plasmatique obtenue de 37,0 ng Equivalent TTX/mL correspond a une concentration letale [1] . Aucune TTX n’a ete detectee dans le plasma et le serum des patients par analyse LC-MS/MS. Chez les deux patients, les concentrations urinaires de TTX obtenues par analyses LC-MS/MS et mELISA et apres application des TEFs montre la presence de concentrations equivalentes en TTX dans tous les echantillons ( Tableau 1 ). Conclusions Les resultats obtenus montrent que la mELISA est un outil pouvant etre utilise pour le depistage rapide de la TTX et de ses analogues dans les echantillons d’urine ainsi que pour estimer le degre de l’intoxication, surmontant certains problemes rencontres au cours de l’analyse LC-MS/MS de ces toxines animales dans l’urine (manque de retention des toxines sur les colonnes classiques en phase inverse ou suppression significative des ions d’interet par interference avec certains composes endogenes). L’analyse complementaire par LC-MS/MS, realisee en parallele, a permis de confirmer l’agent causal et a fourni, de plus, une caracterisation complete du profil multitoxines des echantillons urinaires. A notre connaissance, il s’agit de la premiere description du profil multitoxines dans des echantillons urinaires apres consommation d’un poisson de la famille des tetrodons.