Avances en la modulación de la expresión génica en virus vaccinia recombinantes

El trabajo de esta tesis esta encaminado a mejorar el virus vaccinia como vector de expresion. Un paso previo es la eleccion del sistema de seleccion y aislamiento de los virus recombinantes. Con este fin se evaluo el gen pac omo marcador seleccionable en el virus vaccinia y su posible uso en el aislamiento de virus vaccinia recombinantes. A traves de mutaciones en posiciones proximas al AUG se determino el efecto de mutaciones en las posiciones -3 y +4 con respecto al AUG iniciador en la eficiencia de traduccion de proteinas, en el contexto de una infeccion con el virus de la vacuna. Por ultimo se hizo el diseno y construccion de virus vaccinia recombinantes que expresen un gen exogeno mediante un replicon de alfavirus insertado en el genoma de vaccinia y la construccion y asilamiento de un virus vaccinia recombinante conteniendo un replicon y los genes estructurales de SFV que produzca particulas virales de ciclo unico.