CD160 soluble, un nouveau médiateur de l’échappement tumoral dans le mélanome

Introduction L’immunotherapie a revolutionne la prise en charge du melanome aux stades avances. Cependant, certains patients developpent des resistances. Ceci est notamment lie a la capacite de la tumeur de rendre son environnement immunosuppresseur, favorisant ainsi son echappement au systeme immunitaire. CD160 est un recepteur unique exprime par les lymphocytes NK et T CD8+ cytotoxiques. Sa forme GPI (CD160-GPI) est impliquee dans la mise en place d’une activite cytotoxique. Au cours de l’activation lymphocytaire, cette forme est clivee et liberee sous une forme soluble (sCD160) presentant une fonction immunosuppressive sur les cellules cytotoxiques. Dans le meme temps une isoforme transmembranaire (CD160-TM) est exprimee dont l’engagement permet l’amplification de la reponse cytotoxique. Des marquages preliminaires realises sur des prelevements tumoraux de melanomes de patients (IHC) ont montre une positivite des tumeurs pour CD160. L’objectif du travail etait de valider l’expression de CD160 dans des lignees de melanome (MelC), de definir l’isoforme exprimee par les MelC et de determiner son role potentiel dans ce contexte tumoral. Materiel et methodes Une etude in vitro etait realisee a partir de lignees de melanome presentant differentes mutations (BRAF, NRAS ou NF1) et des melanocytes. L’etude par RT-PCR qualitative et quantitative, avec des amorces specifiques de CD160-TM et CD160-GPI permettait la determination de l’isoforme exprimee. L’expression proteique etait cherchee par Western Blot sur des lysats cellulaires. La localisation cellulaire de CD160 etait analysee par immunofluorescence en microscopie confocale et par une etude en cytometrie en flux realisee avec ou sans permeabilisation prealable des cellules. Enfin, les modulations de l’expression de CD160 etaient evaluees apres administration d’IFNγ. La forme soluble etait cherchee dans le milieu de culture cellulaire par immunoprecipitation. Resultats Nous avons observe une expression constitutive et exclusivement intracellulaire de CD160-GPI par les MelC. CD160-GPI n’etait pas detecte chez les melanocytes. De plus, nous avons mis en evidence une liberation constitutive de sCD160 dans l’environnement des cellules malignes qui peut etre augmentee en presence d’IFNγ pour certaines lignees, y compris celles n’exprimant pas PD-L1. Discussion La liberation de sCD160 par les MelC pourrait representer un mecanisme d’echappement de la tumeur a l’activite lymphocytaire anti-tumorale. En effet il a ete montre precedemment que sCD160 etait capable d’inhiber l’activite cytotoxique des lymphocytes NK et T CD8+ en entrant en competition avec les recepteurs activateurs de ces cellules pour la liaison aux molecules HLA. Conclusion Nous avons identifie un nouveau mecanisme d’echappement des MelC a l’immuno-surveillance, impliquant sCD160, qui pourrait representer une nouvelle cible therapeutique a l’ere de l’immunotherapie.