Perifusion analysis of insulin secretion from specific pathogen-free large-white pig islets shows satisfactory functional characteristics for xenografts in humans.

Si le porc semble etre un donneur de choix pour d'eventuelles greffes chez des patients diabetiques, il existe un risque de transmission d'agents infectieux. Nous avons adopte une strategie d'isolement d'ilots a partir de porcs eleves et abattus dans un environnement exempt d'organismes pathogenes specifiques (EOPS), ce qui est le minimum requis au regard du concept d'assurance qualite. Nous avons etudie la reponse insulinosecretrice de ces ilots de porc EOPS a differents nutriments ou agents hormonaux, neuronaux ou pharmacologiques auxquels ils pourraient etre confrontes chez l'homme, de facon a evaluer s'ils peuvent assurer une regulation efficace de la glycemie lors des situations physiologiques ou physiopathologiques. Les cellules β de 18 porcs EOPS etaient fonctionnellement intactes apres 7 jours de culture. Les index de stimulation (IS) etaient de 3,1 ± 0,2, 2,2 ± 0,1 et 4,4 ± 0,3 en presence de K + 30 mmol/1, Tolbutamide 100 μmol/l et Theophylline 10 mmol/l. L'isulino-secretion basale (72,2 ± 7,6 μU/min) augmentait deja de facon significative (p < 0,001) en presence de glucose 5,5 mmol/l (184,2 ± 25,5 μU/min, IS: 2,5 ± 0.6) indiquant que le seuil de stimulation est comparable a celui d'ilots humains. La secretion d'insuline augmentait de facon dose dependante (p < 0,001) avec des concentrations en glucose de 11,0 mmol/l et 22,0 mmol/l. Meme le phenomene de α memoire au glucose α a pu etre observe avec ces ilots. L'arginine stimulait l'insulinosecretion (p < 0,001) de facon dose dependante (IS: 2,2 ± 0,3 avec 5 mmol/l et 2,9 ± 0,2 avec 10 mmol/l). Les corps cetoniques (β-hydroxybutyrate 10 mmol/l) induisaient egalement une insulinosecretion (IS: 4,3 ± 0,3). La secretion d'insuline etait stimulee parle le GIP 4 μmol/l, revelant une sensibilite aux hormones de l'axe entero-insulaire, et par le glucagon 5 μmol/l. L'IS atteignait 3,4 ± 0,1 avec 30 mmol/l de K +. L'influence cholinergique parasympathique a ete etudiee grâce a 500 μmol/l de carbamycholine qui augmentait l'insulinosecretion. L'influence du controle orthosympathique et des situations de stress a egalement ete etudiee. Comme pour les ilots humains, l'adrenaline 50 μmol/l et son agoniste a2, la Clonidine, inhibaient l'insulinosecretion. Enfin, la preculture des ilots pourrait etre benefique au devenir de la greffe a condition qu'elle n'induise pas une deterioration de leur fonctionnalite. Apres 21 jours de culture, les ilots ne montraient pas de diminution de leur insulinosecretion en reponse au glucose, a l'arginine ou au K+, ni meme d'alteration du seuil de stimulation par le glucose. Ainsi, les porcs EOPS et l'application de notre procedure d'isolement fournissent des ilots avec des caracteristiques fonctionnelles reproductibles et compatibles avec une utilisation potentielle pour une regulation de la glycemie dans les situations physiologiques et physiopathologiques chez l'homme.