晚期缺血预适应（IPC）联合半乳糖凝集素-9通过上调调节性T细胞减轻小鼠肾脏缺血再灌注损伤

目的研究晚期缺血预适应（ischemic preconditioning,IPC）联合半乳糖凝集素-9（galectin-9,Gal-9）对小鼠肾脏缺血再灌注（ischemia reperfusion,IR）损伤的预防作用及可能的机制。方法 75只雄性C57BL/6N小鼠随机分为5组。（1）IR组：d1仅分离两侧肾蒂,不进行预缺血,d5夹闭两侧肾蒂造成缺血35min。（2）IPC-IR组：d1夹闭两侧肾蒂造成18min预缺血,d2~d5每天PBS皮下注射,d5给药后立即夹闭两侧肾蒂造成缺血35min。（3）IPC-Gal9-IR组：d1夹闭两侧肾蒂造成18min预缺血,d2~d5每天给予Gal-9 5μg皮下注射,并于d5给药后夹闭两侧肾蒂造成缺血35min。（4）IPC-Gal9-PC61-IR组：d1夹闭两侧肾蒂造成18min预缺血,d2~d5每天给予Gal-9 5μg皮下注射,d3和d5分别给予调节性T细胞（regulatory T cells,Treg）特异性拮抗剂PC61腹腔注射200μg,并在d5给药后夹闭两侧肾蒂造成缺血35min。（5）sham-sham组：不进行预适应,不给药,不给予IR损伤。以上5组于IR或第2次sham术后24h、72h和7天取样评价肾功能,并采用流式细胞术比较外周血、脾脏和肾脏中Treg的表达量和肾脏固有免疫系统反应程度及炎性因子的分泌。结果缺血再灌注24h及72h小鼠血肌酐IPC-IR组显著低于IR组（P〈0.01）,同时IPC-Gal9-IR组显著低于IPC-IR组（P〈0.05）,而给予Treg特异性拮抗剂的IPC-Gal9-PC61-IR组与IR组差异无统计学意义（P〉0.05）。缺血再灌注24h肾小管间质损伤指数IPC-IR组显著低于IR组（P〈0.05）,同时IPC-Gal9-IR组显著低于IPC-IR组（P〈0.05）。IPC-Gal9-IR组肾脏局部中心粒细胞浸润减轻（P〈0.05）且CD4＋T细胞分泌的IFN-γ减少（P〈0.05）。IPCGal9-IR组外周血、脾脏和肾脏Treg占CD4＋T细胞的比例较IR组显著升高（P〈0.05）。结论晚期IPC联合Gal-9干预对小鼠缺血再灌注肾损伤的保护作用优于单纯缺血预适应,可能与系统上调Treg表达有关。