Detection of human parvovirus B19 nonstructural protein DNA by nested-polymerase chain reaction in pregnant women

目的 探讨巢式PCR技术检测人微小病毒B19(B19病毒)非结构蛋白DNA的灵敏性及特异性.方法参照经典的巢式PCR技术检测B19病毒结构蛋白DNA的方法,检测30例孕妇血清及胎盘绒毛组织中的B19病毒结构蛋白及非结构蛋白DNA.并与人巨细胞病毒、乙肝病毒、丙肝病毒、腺病毒等及人类基因组DNA同批作巢式PCR检测,以观察巢式PCR检测B19病毒非结构蛋白DNA的特异性.结果 (1)巢式PCR检测B19病毒非结构蛋白DNA的最小检出量为0.005 fg,灵敏性可达0.005 fg.(2)B19 病毒质粒模板在103 bp处出现靶条带,而人巨细胞病毒、乙肝病毒、丙肝病毒、腺病毒等及人类基因组DNA均无扩增产物产生.(3)孕妇血清及胎盘、绒毛组织中的B19病毒结构蛋白检出率均为26.7%(8/30),而非结构蛋白DNA检出率在血清中为33.3%(10/30),胎盘、绒毛组织中均为26.7%(8/30).两者比较,差异均无显著性(P>0.05).结论巢式PCR技术检测B19病毒非结构蛋白DNA是一种灵敏、特异、简便、快速诊断B19病毒感染的新方法。