携带 IL-2和 NK4双基因真核共表达载体的减毒沙门菌株的构建

目的：构建携带 IL-2/ NK4双基因真核表达载体的减毒沙门菌菌株。方法利用分子克隆技术将 IL-2及 NK4基因分别插入 PIRES-SEQ 质粒 IRES 序列的上下游中,构建为双基因真核共表达载体 pCMV-IL-2-IRES-NK4,将该质粒利用脂质体转染入细胞,采用 ELISA 及 PCR 法检测 pCMV-IL-2-IRES-NK4转染细胞后 IL-2/ NK4基因及蛋白表达情况。将所构建质粒以电转化法转化减毒沙门菌菌株 Ty21a,从而得到能够表达 IL-2/ NK4双基因的重组减毒沙门菌菌株。结果 ELISA 及 PCR 法检测该质粒可在细胞中以较高的效率稳定表达 IL-2及 NK4基因和蛋白；同时表达 IL-2/ NK4双基因的减毒沙门菌菌株 TPIN 构建成功。结论本研究成功构建了携带 IL-2/ NK4双基因的减毒沙门菌菌株。