Caractérisation des propriétés d'adhésion de Streptococcus thermophilus LMD-9 aux cellules épithéliales intestinales

Les bacteries lactiques presentent un grand interet economique de par leur large utilisation dans l’industrie agroalimentaire. Parmi elles, Streptococcus thermophilus (ST) est d’une importance majeure puisqu’elle est la plus utilisee apres Lactococcus lactis, pour la fabrication de produits laitiers fermentes et de fromages. De plus, cette bacterie est le seul streptocoque a beneficier du statut GRAS (Generally Recognized As Safe). Outre son interet en industrie laitiere, ST presente des effets benefiques sur la sante intestinale de l’Homme. Bien que ces effets soient largement documentes, le statut probiotique de ST reste encore a conforter. C’est pourquoi des etudes sont actuellement menees afin de selectionner des souches de ST a fort potentiel probiotique. Parmi les criteres importants figurent leur capacite a survivre aux conditions drastiques du tube digestif (TD) et leur capacite a adherer aux cellules intestinales. Dans cette optique, les objectifs de cette these etaient d’etudier, dans un premier temps, la capacite d’adhesion in vitro de la souche ST LMD-9 a differentes lignees cellulaires intestinales d’origine humaine et d’evaluer la survie de cette souche au stress biliaire. Afin de mettre en evidence un role potentiel de certaines proteines de surface dans ces deux processus, trois mutants issus de cette souche et inactives dans les genes prtS (protease parietale), srtA (sortase A) et mucBP (proteine de liaison aux mucines), ont ete inclus dans cette etude. Dans un second temps, l’impact de l’adhesion de LMD-9 a ete analyse, d’une part sur l’expression de genes codant certaines mucines dans les cellules eucaryotes, et d’autre part sur l’expression de genes qui seraient specifiquement induits durant le processus d’adhesion, ceci en utilisant la technologie R-IVET (Recombinase-based In Vivo Expression Technology). Les resultats obtenus ont permis de montrer que la souche LMD-9 etait capable de survivre jusqu’a une concentration de 3 mM en sels biliaires et que les proteines de surface PrtS, SrtA et MucBP seraient impliquees dans la resistance a ce stress. Nos resultats ont egalement montre que LMD-9 adherait aux trois differentes lignees cellulaires, suggerant ainsi que la souche pourrait interagir avec les differentes mucines qu’elle peut rencontrer dans le TD. De plus, l’implication de certaines proteines de surface dans l’adhesion de LMD-9 s’est averee dependante des caracteristiques de ces lignees, qu’il s’agisse de cellules enterocytaires (Caco-2) ou productrices de mucus (HT29-MTX et HT29-CL.16E). Concernant l’impact de l’adhesion de la souche LMD-9 sur l’expression des genes MUC2 et MUC5AC, aucun effet sur le taux de transcrits n’a ete observe dans nos conditions experimentales. Par ailleurs, nos resultats ont permis, pour la premiere fois, d’identifier les genes specifiquement induits dans la souche LMD-9 durant l’adhesion aux cellules epitheliales. Nous avons ainsi montre que l’adhesion de la souche LMD-9 ne depend pas uniquement des proteines de surface, mais d’autres fonctions et voies metaboliques seraient egalement impliquees. Ce travail de these contribue ainsi a apporter de nouvelles connaissances liees (i) au choix du modele cellulaire dans les etudes d’adhesion bacterienne in vitro, (ii) a l’aptitude de la souche LMD-9 a survivre au stress biliaire en faisant intervenir certaines proteines de surface et (iii) a la comprehension des mecanismes moleculaires de l’adhesion de LMD-9 aux cellules epitheliales intestinales