Analýza malých změn Fc-glykosylace IgG s využitím izotopového značení glykopeptidů

Tato prace představuje nový přistup pro profilovani Fc-glykosylace IgG založený na znaceni glykopeptidů stabilnimi izotopovými znackami. Anhydrid kyseliny sukcinove (SA) byl vybran jako vhodna znacka, protože snadno reaguje s primarni aminovou skupinou přitomnou na vsech peptidech. Těžka forma (D413C4) soucasně poskytuje proti sve přirozene lehke formě dostatecný hmotnostni rozdil (8 Da) pro analýzu celých glykopeptidů jednoduchou MS analýzou. Přimocarý protokol pro připravu vzorků zahrnujici trypticke stěpeni, znaceni a extrakci na pevne fazi byl vyvinut a uspěsně použit pro analýzu několika vzorků polyklonalnich IgG. Znacene glykopeptidy byly analyzovany pomoci MALDI MS a take LC-ESI MS.