玫瑰黄链霉菌Men-myco-93-63 nsdA（mgh）基因阻断突变株的构建

为研究从玫瑰黄链霉菌Men-myco-93-63中克隆到的,与天蓝色链霉菌M 145中的一个重要负调控基因nsd A基因同源的nsdA（mgh）基因的功能,本文构建了nsd A（mgh）基因破坏型重组质粒pSRNA2500（pKC1139：：1.5 kb nsdA（mgh）：：1.0 kb Km-r）,转化ET12567（pUZ8002）获得接合转移供体菌ET12567（pUZ8002,pSRNA2500）,通过接合转移将重组质粒导入玫瑰黄链霉菌Men-myco-93-63中。在高温和抗生素双重筛选压力下,筛选得到表型为Am-sKm-r的nsd A（mgh）基因阻断突变株,通过PCR、Dot bloting和Southern blotting验证了突变株中的nsdA（mgh）基因已被正确阻断。与出发菌株相比,突变株在摇瓶水平上对棉花黄萎病菌的抑制能力提高了一倍。