二烯丙基二硫化物对人胃癌MGC803细胞G2／M期检查点激酶Chk1／2的影响

目的：观察二烯丙基二硫化物（DADS）对人胃癌MGC803细胞的细胞周期检查点激酶1（Chk1）和细胞周期检查点激酶2（Chk2）的影响。方法：RT—PCR检测MGC803细胞的Chk1和Chk2激酶在mRNA水平的改变；Westernblotting检测Chk1、Chk2的表达和Chk1、Chk2的磷酸化程度，免疫共沉淀检测Chk1、Chk2与细胞分裂周期蛋白25C（Cdc25C）结合情况。结果：RT—PCR检测显示，Chk1和Chk2mRNA水平在处理组与未处理组之间无明显差异（P〉0．05）。Westernblotting检测显示，MGC803细胞分别受30mg·L^-1DADS刺激1h和2h后，与未处理组相比，总Chk1和Chk2蛋白表达在细胞处理前后均无明显改变（P〉0．05）；但处理组细胞Chk1磷酸化程度明显增加，并呈时间依赖性（P〈0．01），而Chk2在处理组与未处理组问磷酸化程度无明显差异（P〉0．05）。免疫共沉淀分析表明，MGC803细胞中DADS能促进Chk1与Cdc25C结合，而对Chk2与Cdc25C结合无影响。结论：DADS可能是通过激活Chk1引起人胃癌MGC803细胞G2／M期阻滞。