大鼠海马β—肾上腺素受体和烟碱受体亚型在烟碱激活p44／42MAPK中的作用

目的为探讨烟碱对海马脑片p44/42MAPK磷酸化的影响,以及β-肾上腺素受体(β-AR)、烟碱受体亚型在其中的作用.方法将400 μm厚的海马脑片置于预先经95%O2和5%CO2饱和的28℃人工脑脊液中预孵90 min后分别加入普萘洛尔、α-银环蛇毒素和美卡拉明,30 min后再加入烟碱,使其终浓度分别为1和100 μmol·L-1.于烟碱作用90 min时,运用免疫印迹法检测这3个受体阻断剂对烟碱引起的p44/42MAPK磷酸化的抑制效果.结果烟碱对p44/42MAPK磷酸化的作用与烟碱浓度有关,100 μmol·L-1烟碱比1 μmol·L-1烟碱作用强.美卡拉明单独作用可阻断1 μmol·L-1烟碱和部分阻断100 μmol·L-1烟碱引起的p42MAPK磷酸化;α-银环蛇毒素只能阻断100 μmol·L-1烟碱引起的p42/44MAPK磷酸化;但同时使用这两种烟碱受体阻断剂时,两种浓度烟碱引起的p44/42MAPK磷酸化均可被完全阻断;普萘洛尔对1 μmol·L-1烟碱引起的p44MAPK磷酸化和100 μmol·L-1烟碱引起的p42MAPK磷酸化仅有部分阻止作用.结论在烟碱激活的p44/42MAPK中,不同烟碱受体亚型在不同烟碱浓度中起作用;β-AR仅参与烟碱引起的p44/42MAPK部分磷酸化.