人白细胞介素1β通过线粒体途径激活caspase-3诱导A375-S2细胞凋亡

目的研究人白细胞介素1β(Interleukin-1β, IL-1β)体外诱导人黑色素瘤A375-S2细胞凋亡的机制.方法通过Hoechst33258荧光染色,观察A375-S2细胞在IL-1β作用下的形态学变化.使用琼脂糖凝胶电泳法检测IL-1β对细胞DNA降解的影响.应用caspase活力测定法检测IL-1β对caspase-3活力的影响.利用Western blot方法检测IL-1β对caspase-3底物的降解以及对细胞内Bcl-2家族和AIF蛋白表达的调节作用.结果 IL-1β(1 nmol/L)能够诱导A375-S2细胞凋亡,72 h时细胞体变小,细胞核呈现固缩、断裂,并出现因凋亡引起的DNA梯状条带.IL-1β诱导细胞凋亡过程中,caspase-3的活力升高,其两种底物PARP和ICAD均发生降解,线粒体中抗凋亡蛋白Bcl-2和Bcl-xL的表达减少,促凋亡蛋白Bax的表达增加.凋亡诱导因子AIF蛋白的表达也有所增加.结论 IL-1β通过激活caspase-3降解其底物,激活AIF,并上调线粒体内Bax/Bcl-2和Bax/Bcl-xL的表达比例诱导A375-S2细胞凋亡.