Valoracion de la calidad del injerto hepático mediante la determinación de los patrones metabonómicos en biopsia del hígado donante

El trasplante de higado (TH) constituye en el tratamiento de eleccion para las enfermedades hepaticas en estadio terminal, sin embargo, el desequilibrio entre el numero de donantes y pacientes en lista de espera ha conducido a la utilizacion de injertos procedentes de donantes con criterios extendidos. Esta practica, se ha traducido en una reduccion de la tasa de mortalidad entre los pacientes en lista de espera, a expensas de un aumento de las complicaciones post-trasplante, como la disfuncion temprana del injerto (EAD). Actualmente, sigue faltando un test fiable que evalue la calidad del injerto hepatico y permita predecir su funcionalidad. En este proyecto proponemos la realizacion de un analisis metabonomico mediante espectrometria de masas acoplada a cromatografia liquida de tejido hepatico del donante en el momento de la extraccion, que permitiria obtener un conjunto de biomarcadores de disfuncion del injerto, que podrian estar relacionados con la calidad del injerto hepatico y asi, anticipar la funcion del organo. El primer objetivo de este proyecto consistio en la busqueda de una firma metabonomica en biopsias de higado de donantes, asociada con la EAD. Los injertos hepaticos de los que se obtuvo biopsia para el analisis metabonomico fueron clasificados en dos grupos, de acuerdo a su funcion en el receptor: i) pacientes con EAD, ii) pacientes con funcion inmediata del injerto (IGF). Con el objetivo de investigar la relacion entre los perfiles metabonomicos presentes en los higados de los donantes antes del trasplante y su funcion en el receptor, realizamos un analisis multivariante de los datos, tratando de identificar el conjunto de biomarcadores asociados a EAD. Los principales cambios metabonomicos observados incluyeron un aumento significativo de los niveles de sales biliares, lisofosfolipidos, fosfolipidos, esfingomielinas y productos del metabolismo de la histidina. Una vez identificamos un perfil metabonomico en los higados donantes capaz de predecir la EAD, echamos en falta la existencia de una clasificacion clinica de EAD mas precisa con el fin de poder correlacionar de un modo mas exacto el perfil metabonomico del higado donante con el grado de disfuncion tras el TH. Por lo tanto, el segundo objetivo de este proyecto consistio en el desarrollo de un modelo continuo para la evaluacion temprana de la funcion del injerto al que llamamos “model for early allograft function” (MEAF). Mediante el estudio retrospectivo incluyendo 1.026 trasplantes hepaticos consecutivos pertenecientes a un mismo centro, construimos un modelo basado en parametros clinicos (ALT, INR y bilirrubina), con el objetivo de puntuar la funcion hepatica del injerto tras el TH entre 0 y 10. La puntuacion MEAF mostro una asociacion significativa con la supervivencia del paciente y del injerto. Valores elevados del MEAF score pueden alertar a los medicos que el paciente esta en riesgo de sufrir complicaciones relacionadas con la disfuncion del injerto y tambien puede ayudar en los estudios traslacionales que requieren una clasificacion mas precisa y objetiva de la funcion del injerto. Nuestro tercer y ultimo objetivo del trabajo fue estudiar la asociacion entre el MEAF score y los niveles de los marcadores de EAD encontrados mediante el analisis metabonomico, lo que nos permitio asignar una puntuacion reflejo de la calidad del injerto para cada higado donante.