Akt-eNOS-NO信号途径介导了Ang-1和Ang-2对大鼠失血性休克早期血管高反应性的调节作用

目的：观察内皮型一氧化氮合酶（endothelial nitric oxide synthase,eNOS）在血管生成素1（angiopoietin-1,Ang-1）和血管生成素2（angiopoietin-2,Ang-2）调节失血性休克大鼠血管反应性双相变化中的作用及其机制.方法：采用Western blotting技术观察失血性休克后不同时点肠系膜上动脉（superior mesenteric artery,SMA）中eNOS蛋白表达变化,采用离体微血管环张力测定技术观察eNOS抑制剂对Ang-1和Ang-2调节缺氧早期和晚期血管反应性作用的影响,并观察给予Ang-1、Ang-2以及Tie-2、Akt、p38 MAPK、ERK抑制剂后缺氧血管内皮细胞（vascular endothelial cells,VECs）和血管平滑肌细胞（vascular smooth muscle cells,VSMCs）混合培养物中eNOS蛋白表达和培养上清一氧化氮（nitric oxide,NO）含量的影响.结果：（1） eNOS在正常SMA中表达很低,失血性休克后逐渐增高,休克10 min、30 min、1 h、2 h和4 h时分别增高至正常对照的1.95、2.10、3.01、3.42和3.57倍（P〈0.01）.（2）eNOS抑制剂可显著抑制缺氧10 min的血管高反应性,去甲肾上腺素（NE）的Emax由13.479 mN降低至9.043 mN （P〈0.01）,也可以显著抑制Ang-1对缺氧10 min血管高反应性的维持作用,NE的Emax由15.283 mN降低至11.219 mN （P〈0.01）,但不改变Ang-2降低缺氧10 min血管高反应性作用,也不改变缺氧4 h的血管低反应性和Ang-1、Ang-2对缺氧4 h血管反应性的调节作用.（3）缺氧10 min的eNOS表达较正常对照增高,Ang-2和Tie-2、Akt抑制剂可抑制其增高（P〈0.01）,p38 MAPK、ERK抑制剂对其无显著影响.（4）NO含量在缺氧10 min显著增高,Ang-2和Tie-2、Akt、eNOS抑制剂可抑制其增高 （P〈0.01）,p38 MAPK、ERK抑制剂对其无显著影响.结论：失血性休克早期,Ang-1和Ang-2通过Akt-eNOS-NO途径来调节血管高反应性.