Terapia celular de la diabetes mellitus: optimización de los procedimientos de diferenciación e inducción de tolerancia

La Diabetes Mellitus es una enfermedad metabolica cronica caracterizada por la presencia de elevados niveles de glucosa en sangre, como consecuencia de un fallo en la produccion de insulina por el pancreas y/o por la ineficacia de su uso por el organismo. El trasplante de pancreas, al igual que sucede en cualquier trasplante de organos, esta sometido a la escasez de donantes, y debido a la alta prevalencia de la diabetes a nivel mundial y la estimacion de su incremento en los proximos anos, este problema se ve agravado. Por ello, cientificos de todo el mundo tratan de encontrar fuentes alternativas para la terapia de la diabetes, que puede ser enfocada desde dos perspectivas distintas. Por un lado, la sustitucion de las celulas beta pancreaticas productora de insulina, ambito en el cual las celulas madre (CM) han ganado terreno en las ultimas decadas, gracias a su capacidad de proliferacion y diferenciacion hacia los distintos linajes. Y, por otro lado, la deteccion de la destruccion de las celulas beta mediante el control del sistema inmune. En este sentido, el papel de las celulas T reguladoras (Treg) parecen ser fundamental debido a su capacidad de mediar el balance entre la tolerancia y la autoinmunidad. Este trabajo se ha centrado en el estudio de la regulacion del factor de transcripcion Pdx1 en celulas madre embrionarias de raton (CMEr), debido a su implicacion en la embriogenesis y funcion pancreatica. El estudio epigenetico del promotor de Pdx1, asi como el estudio de la regulacion por distintos factores de transcripcion, nos ha permitido desarrollar un protocolo de diferenciacion de CMEr hacia celulas productoras de insulina. Este protocolo esta basado en la adicion de pequenas moleculas, y consigue la obtencion de celulas productoras de insulina maduras in vitro. Asimismo, este protocolo parece ser reproducible en celulas madre humanas, por lo que puede ser una alternativa o proporcionar complementariedad a los protocolos de diferenciacion existentes, reduciendo de forma significativa su costo y complejidad. En este trabajo nos hemos centrado tambien en el estudio y caracterizacion de celulas Treg procedentes de sangre de cordon umbilical y sangre periferica de adulto, ademas de comparar dos tecnicas de seleccion distintas. Este estudio ha revelado que existen diferencias significativas en funcion de la procedencia y tecnica de aislamiento empleada, por lo que este analisis proporciona datos interesantes a tener en cuenta para el uso de las celulas Treg en terapia celular.