硫化氢对Aβ 25-35 诱导的小鼠Neuro-2a细胞自噬的影响

目的 探讨硫化氢（H 2 S）对Aβ 25-35 诱导的小鼠成神经细胞瘤细胞Neuro-2a自噬的影响及其潜在机制。 方法 将Neuro-2a细胞随机分为空白对照组、Aβ 25-35 处理组、Aβ 25-35 +NaHS组、Aβ 25-35 +3-甲基腺嘌呤（3-MA）组、NaHS组及Aβ 25-35 +NaHS+LY294002组。Aβ 25-35 +NaHS组和Aβ 25-35 +3-MA组细胞分别用NaHS和3-MA预处理2 h后均加用Aβ 25-35 继续处理24 h；Aβ 25-35 +NaHS+LY294002组除加入NaHS预处理外需在Aβ 25-35 处理前0.5 h加入特异性PI3K/Akt通路抑制剂LY294002。采用MTT法观察各组细胞存活率，蛋白质印迹法检测自噬蛋白Beclin-1、微管相关蛋白（LC3）及P62的表达，免疫荧光法检测LC3的表达及分布，透射电镜法观察自噬体的形成。 结果 （1）与空白对照组相比，Aβ 25-35 作用细胞后细胞存活率降低（ P P 25-35 组相比，Aβ 25-35 +3-MA组和Aβ 25-35 +NaHS组细胞存活率均增高（ P P 25-35 +NaHS组p-Akt和p-mTOR的表达高于Aβ 25-35 组（ P 25-35 +NaHS+LY294002组细胞p-Akt和p-mTOR表达与Aβ 25-35 +NaHS组相比降低（ P < 0.05）。 结论 外源性H 2 S能对抗Aβ 25-35 的细胞毒性，可能与活化PI3K/Akt/mTOR途径抑制Aβ 25-35 引起的细胞自噬相关。