携带Survivin-△3（T34A）的减毒鼠伤寒沙门菌

目的探讨携带Survivin—A3（T34A）基因的减毒鼠伤寒沙门菌口服疫苗对乳腺瘤MCF一7注射细胞小鼠的保护作用及其效果。方法人工合成Survivin-A3（T34A）基因，先后将其克隆到真核表达载体pEGFP—N1和pVAX1载体，获得pVAX1—Survivin—A3（T34A）-EGFP真核表达载体，电转化至减毒鼠伤寒沙门菌；小鼠分别口服pVAX1-Survivin—A3（T34A）-EGFP转染沙门菌（实验组）、pVAX1—EGFP转染沙门菌（空质粒组）、沙门菌（对照组）和PBS（空白对照组）后，再皮下注射MCF-7乳腺癌细胞，采用Western—blotting检测Survivin—A3（T34A）蛋白水平，以及测定注射部位瘤块的体积大小。结果成功构建了真核表达载体pVAXl-Survivin—A3（T34A）-EGFP并转化到减毒鼠伤寒沙门菌得到表达；在空质粒组、细菌组、空白对照组和实验组小鼠中，肿瘤瘤块平均直径分别为（25．813±0．108）mrn、（25．627±0．117）mm、（26．257±0．213）mm、（9．124±0．086）mm；实验组与其他组相比，差异有统计学意义（P〈0．05），且能在血清中检测到Survivin—A3（T34A）-EGFP融合蛋白的存在。结论小鼠口服携带Survivin—△3（T34A）真核质粒的沙门菌后，能够抑制MCF-7乳腺瘤细胞的增殖和扩散。