Rapid detect on of rpoB mutation in rifampin-resistant Mycobacterium tuberculosis by use of line probe array

目的 研制线性探针分析法检测结核分枝杆菌(结核菌)rpoB基因耐药突变试剂盒.方法设计15条结核菌rpoB基因野生型和突变型的线性探针,固定尼龙膜上;在rpoB基因引物上标记生物素,扩增结核菌DNA,获得生物素标记扩增产物,与rpoB基因线性探针杂交,加入标记过氧化物酶的亲合素,再加四甲基联苯胺显色.结果应用线性探针分析法检测87株结核菌,其与rpoB基因直接测序法、传统药敏法符合率分别为98.8%(82/83)和94.3%(82/87).结论线性探针分析法检测rpoB耐药基因突变是一种操作简便、特异性高、敏感性高,易开展的方法。