Analyse genetique et moleculaire du domaine cryptique dihydroorotase like de levure : un modele d'etude de l'evolution des proteines multifonctionnelles gatase/cpsase-dhoase-atcase

Le gene ura2 de saccharomyces cerevisiae code pour une proteine bifonctionnelle comprenant deux domaines actifs qui portent les activites glutamine amino transferase/carbamyl phosphate synthetase (gatase/cpsase) et aspartate transcarbamylase (atcase). Entre ces deux domaines fonctionnels, il existe sur cette proteine un domaine cryptique appele dihydroorotase like (dhoase like), inactif a l'etat sauvage. Ce domaine presente une homologie de taille, de position et de sequence peptidique avec le domaine actif equivalent des proteines trifonctionnelles gatase/cpsase-dhoase-atcase d'eucaryotes superieurs. Par l'etude de ce domaine cryptique de levure, nous avons donc cherche a determiner comment se situait sur le plan evolutif le produit du gene ura2, par rapport aux structures rencontrees chez les eucaryotes superieurs. Des etudes paralleles portant sur l'expression en contexte heterologue levure du domaine dhoase actif des eucaryotes superieurs, et sur le produit du gene ura1 de schizosaccharomyces pombe, gene equivalent a ura2 de s. Cerevisiae, completent ce travail qui debouche sur l'etablissement d'un modele evolutif de la constitution des proteines multifonctionnelles eucaryotes