O uso da reação de polimerase em cadeia na monitoração genetica de linhagens isogenicas de camundongos utilizados em imunologia

Importantes pesquisadores mostraram nas decadas de 30 e 40, que a constituicao genetica dos animais de experimentacao, e fundamental para o estudo da resposta imune. Por esta razao, o uso de camundongo de mesma linhagem mantidos em diferentes laboratorios deve permitir a obtencao de resultados universais e que possam ser reproduzidos. Isto e possivel apenas com linhagens padronizadas e monitoradas geneticamente, de forma que alteracoes no genoma provenientes de contaminacoes ou mutacoes, possam ser detectadas. A inexistencia de linhagens certificadas e padronizadas do ponto de vista genetico no pais, exigiu o estabelecimento de novas colonias e de condicoes para a monitoracao das linhagens utilizadas na pesquisa biomedica em geral e particularmente em imunologia. Para atingir este objetivo realizamos o presente trabalho que visou implantar a partir de linhagens certificadas: colonias de fundacao mantidas com procedimentos operacionais padronizados; bando de embrioes para perpetuacao das caracteristicas originais; banco de DNA para programas de monitoracao genetica. A partir da consolidacao destas metodologias e utilizando a tecnica de PCR na ampilificacao de microsatelites polimorficos presentes em moleculas de DNA de alto peso molecular, foi realizada uma analise do perfil genetico para as linhagens de camundongos CBA, BALB/c, C54BL/6, C3H]He e A/J, oriundas de cinco instituicoes que mantem programas de pesquisa na area de imunologia. Os resultados obtidos com os primers Crp, Igh-V, D3Mit49, D17Mit16, Igh, Ngfg, Plau e D16Mit5, mostraram que as linhagens CBA das instituicoes A e B e BALB/c da instituicao D, apresentaram resultados diferentes dos animais oriundos do Instituto Pasteur utilizados como padrao. Os dados atestam a nao identidade generica para algumas das linhagens testadas e apontam para a necessidade de um levantamento nacional associado ao estabelecimento de programas de monitoramento periodico em colonias de bioterios brasileiros Abstract