FSH对体外培养仔猪睾丸支持细胞cyclin D1 mRNA和cyclin E1 mRNA表达的影响

【目的】确定FSH是否能调节支持细胞cyclin D1 mRNA和cyclin E1 mRNA的表达及可能的机制。【方法】以培养的仔猪睾丸支持细胞为试验材料,通过添加各种信号通路的抑制剂,应用实时荧光定量PCR检测cyclinD1 mRNA和cyclin E1 mRNA的相对表达量。【结果】不同浓度的FSH（0—100 ng.mL-1）均可促进cyclin D1 mRNA和cyclin E1 mRNA的表达（P〈0.05）,在FSH浓度为50 ng.mL-1时两种基因的表达量最大（P〈0.05）;FSH（50 ng.mL-1）也以时间依赖的方式促进了cyclin D1 mRNA和cyclin E1 mRNA的表达（P〈0.05）,在作用30 min时其表达量达到高峰（P〈0.05）。不同浓度的Foskolin（0—20μmol.L-1）均可以促进cyclin D1 mRNA和cyclin E1 mRNA的表达（P〈0.05）,但均低于FSH单独作用时两种基因的表达量;Rp-cAMP（0—40μmol.L-1）、H-89（0—30μmol.L-1）和Verapamil（0—100μg.mL-1）以剂量依赖的方式抑制了FSH诱导的cyclin D1 mRNA和cyclin E1 mRNA的表达（P〈0.05）,而且Rp-cAMP和Verapamil联合作用对FSH的抑制效果高于单独的抑制效果（P〈0.05）,但低于两者之和。此外,不同浓度的U0126（0—10μmol.L-1）降低了FSH诱导的cyclin D1 mRNA和cyclin E1 mRNA的表达（P〈0.05）,而Rp-cAMP、H-89、Verapamil和U0126单独作用时,cyclin D1 mRNA和cyclin E1 mRNA的表达与对照相比没有显著差异（P〉0.05）。【结论】FSH以剂量依赖和时间依赖的方式诱导了cyclin D1 mRNA和cyclinE1 mRNA的表达;cAMP-PKA、Ca2＋和ERK1/2参与了FSH对cyclin D1 mRNA和cyclin E1 mRNA表达的调节。