СТРУКТУРНО-ФУНКЦИОНАЛЬНОЕ ИССЛЕДОВАНИЕ КАТАЛИТИЧЕСКОГО АНТИИДИОТИПИЧЕСКОГО АНТИТЕЛА К АЦЕТИЛХОЛИНЭСТЕРАЗЕ ЭРИТРОЦИТОВ ЧЕЛОВЕКА

Проведено структурно-функциональное исследование каталитического моноклонального антитела 9А8 (ΜΑ 9А8), являющегося антиидиотипом к антителу АЕ-2, полученному на активный центр ацетилхолинэстеразы эритроцитов человека. Методом поверхностного плазмонного резонанса показано специфическое связывание ΜΑ 9А8 с МА АЕ-2 (K 2.26 x 109 М-1). Продемонстрирована функциональная активность ΜΑ 9А8. В отличие от ацетилхолинэстеразы, оно специфически реагирует с фосфонатными необратимыми ингибиторами эстераз. Методом MALDI-масс-спектрометрии проанализированы результаты пептидного картирования ΜΑ 9А8. Показано, что остаток Ser99 тяжелой цепи входит в состав активного центра каталитического антитела. Проведено компьютерное моделирование активного центра ΜΑ 9А8. На основании анализа модели высказано предположение о существовании каталитической диады, сформированной остатками Ser99 и His35. Сравнение трехмерных структур ΜА 9А8 и.каталитического антитела ΜА 17Е8, также обладающего эстеразной активностью, но полученного на стабильный аналог переходного состояния реакции, показало практически полное совпадение строения их предполагаемых активных центров.