Santiago Dueñas Carrera

Centro de Ingeniería Genética y Biotecnología

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LÁ

Liz Álvarez Lajonchere

Centro de Ingeniería Genética y Biotecnología

Ivis Guerra

Centro de Ingeniería Genética y Biotecnología

Juan Morales

Universidad Nacional de Colombia

Nelson Acosta‐Rivero

Centro de Ingeniería Genética y Biotecnología

Gillian Martínez

Centro de Ingeniería Genética y Biotecnología

Lázaro J Lorenzo

Alexis Musacchio

Centro de Ingeniería Genética y Biotecnología

Yalena Amador Cañizares

Centro de Ingeniería Genética y Biotecnología

Marcia Samada

Universidad de Ciencias Médicas de la Habana

Judith M. Hübschen

Luxembourg Institute of Health

Cooperative Institutions

Centro de Ingeniería Genética y Biotecnología

Cuban Neuroscience Center

Instituto de Medicina Tropical “Pedro Kourí”

Center of Molecular Immunology (Cuba)

ORCID

University of Havana

Instituto de Gastroenterología

Applied Scientific Research (United States)

Instituto de Medicina Tropical

National Center for Genetic Engineering and Biotechnology

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Hepatitis C virus: new lights on the horizon

Biotecnología aplicada (2004)

Santiago Dueñas Carrera Alexis Musacchio

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Immunization with HCV synthetic peptides conjugated to the P64k protein elicited strong antibody response in mice

Biotecnología aplicada (2003)

Liz Álvarez Lajonchere Gillian Martínez Juan Morales Julio Aguilar Santiago Dueñas Carrera

Antibody response

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Variable level expression of hepatitis C virus core protein in a prokaryotic system. Analysis of the humoral response against it in rabbits

Biotecnología aplicada (1999)

Santiago Dueñas Carrera Juan Morales Nelson Acosta‐Rivero Lázaro J Lorenzo C. García-Álvarez

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Generation of HIV-1 and Internal Control Transcripts as Standards for an In-House Quantitative Competitive RT-PCR Assay to Determine HIV-1 Viral Load

Biotechnology Research International (2011)

Anny Armas Cayarga Yenitse Perea Hernández Yaimé Josefina González González Santiago Dueñas Carrera Idania González Pérez

Human immunodeficiency virus type-1 (HIV-1) viral load is useful for monitoring disease progression in HIV-infected individuals. We generated RNA standards of HIV-1 and internal control (IC) by in vitro transcription and evaluated its performance in a quantitative reverse transcription polymerase chain reaction (qRT-PCR) assay. HIV-1 and IC standards were obtained at high RNA concentrations, without DNA contamination. When these transcripts were included as standards in a qRT-PCR assay, it was obtained a good accuracy (±0.5 log(10) unit of the expected results) in the quantification of the HIV-1 RNA international standard and controls. The lower limit detection achieved using these standards was 511.0 IU/mL. A high correlation (r = 0.925) was obtained between the in-house qRT-PCR assay and the NucliSens easyQ HIV-1 test (bioMerieux) for HIV-1 RNA quantitation with clinical samples (N = 14). HIV-1 and IC RNA transcripts, generated in this study, proved to be useful as standards in an in-house qRT-PCR assay for determination of HIV-1 viral load.

10.4061/2011/964831

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Generation and characterization of recombinant vaccinia viruses expressing a hepatitis C virus Core protein, genotype 1b, individually or as a polyprotein

Biotecnología aplicada (2007)

Liz Álvarez Lajonchere Ivis Guerra Yalena Amador Cañizares Roberto Frías Dania Vázquez Blomquist

La proteina de la capsida del virus de la hepatitis C es un antigeno interesante con importantes funciones en el ciclo de vida de este patogeno. En el presente trabajo se generaron y caracterizaron virus vaccinias recombinantes que expresan la proteina de la capsida del VHC de genotipo 1b, individualmente (vvCore) o como poliproteina Capsida-E1-E2 (vvRE). En general, el titulo viral de los virus vaccinias recombinantes, que expresan la proteina de la capsida en celulas BSC40 infectadas, fue similar al detectado en las celulas BSC40 infectadas con el virus vaccinia control Western Reserve. Adicionalmente, la inoculacion intraperitoneal de ratones BALB/c con 106 unidades formadoras de placas (ufp) de vvCore o vvRE infecto de forma efectiva los animales. La carga viral detectada en los ovarios de los ratones infectados fue similar para los virus recombinantes y el virus vaccinia control. Ademas, hasta 108 ufp de virus vaccinias recombinantes fueron inoculadas a ratones BALB/c sin consecuencias letales. Resulto interesante que despues de una sola inoculacion de virus vaccinias recombinantes no fue posible detectar una respuesta especifica de anticuerpos o de celulas secretoras de IFN-gamma contra el antigeno de la capsida del VHC. Los virus vaccinias recombinantes generados, que expresan la proteina de la capsida del VHC, son instrumentos valiosos para el desarrollo de modelos sustitutos de reto y para futuros estudios in vitro e in vivo de diferentes aspectos relacionados con este antigeno viral

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HCV genotype determination in monoinfected and HIV co-infected patients in Cuba

Transactions of the Royal Society of Tropical Medicine and Hygiene (2012)

Licel de los Ángeles Rodríguez Lay María Caridad Montalvo Villalba Marité Bello Corredor Susel Sariego Frómeta Jeny Marante Hernández

With the aim to characterize the HCV genotype distribution in Cuba, sera were collected from two subgroups: HCV-monoinfected and HCV/HIV co-infected patients. A combination of reverse transcription-PCR using genotype-specific primers, restriction fragment length polymorphism and sequencing was used to determine the genotype of 84 samples. Seventy-nine (94%) showed single infections (10 [12%] were genotype 1a and 69 [82%] genotype 1b) and 5 (6%) samples corresponded to mixed infections (2 [2%] with genotypes 1a/3a and 1 sample [1%] each with 1b/3a, 1b/4a and 1a/1b/3a). HCV/HIV co-infected subjects had a higher frequency of mixed infections (p=0.08), infection with genotype 3a (p=0.18) and for the first time genotype 4a was found. There was no association of any demographic characteristics with any specific genotype although HCV/HIV co-infected patients showed a tendency to have mixed genotypes in those older than 45 years of age (p=0.11). Phylogenetic analysis showed that HCV isolates clustered with subtypes 1b (n=15, maximal genetic distance 2.51%) and 1a (n=2, maximal genetic distance 0.35%). This report presents the prevalence of HCV genotypes in monoinfected and HIV co-infected patients, mixed HCV infections in HCV/HIV co-infected men who have sex with men with high-risk sexual practices and for the first time identifies that the uncommon genotype 4a can be present in a patient co-infected with HIV.

10.1016/j.trstmh.2012.08.001

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New alternatives for the development of vaccine preparations: contributions to the knowledge on the interaction of recombinant protein viral antigens with nucleic acids

Biotecnología aplicada (2007)

Santiago Dueñas Carrera Liz Álvarez Lajonchere Alexis Musacchio Nelson Acosta‐Rivero Falcón Viviana

Actualmente no se cuenta con herramientas efectivas para combatir multiples patogenos debido en gran medida al insuficiente conocimiento de sus componentes y al limitado arsenal de alternativas vacunales. En el presente trabajo, se estudian mezclas de antigenos proteicos virales recombinantes y acidos nucleicos mediante microscopia electronica, migracion electroforetica, digestion con nucleasas y gradientes de sacarosa o cloruro de Cesio. Se aportan elementos novedosos acerca de la morfologia, tamano, y el incremento de la estabilidad de las particulas proteicas formadas por el antigeno viral en asociacion con acidos nucleicos. Se demuestra por primera vez que particulas proteicas recombinantes de una capsida viral son capaces de interactuar con un plasmidio para la inmunizacion con ADN, formandose complejos con densidad incrementada y mayor tamano de las particulas. Adicionalmente, se estudia la inmunogenicidad de estas mezclas de antigenos proteicos virales recombinantes y plasmidios para la inmunizacion con ADN en modelos animales, demostrandose por primera vez la potenciacion de la respuesta inmune inducida por la administracion de estas mezclas, con relacion a la generada por los componentes individuales. Se plantean los posibles mecanismos de potenciacion de la respuesta inmune, basados en las evidencias experimentales de interaccion entre los componentes de las mezclas y sus propiedades. El empleo de antigenos proteicos virales recombinantes, capaces de interactuar con acidos nucleicos, como principio activo y simultaneamente como adyuvante o vehiculo molecular para vacunas de ADN, tiene implicaciones importantes para el desarrollo de nuevas estrategias efectivas para la prevencion y el tratamiento de enfermedades ocasionadas por diferentes patogenos

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Definición de un candidato vacunal contra el virus de la hepatitis C a partir de los resultados de estudios pre-clínicos

Biotecnología aplicada (2001)

Santiago Dueñas Carrera Liz Álvarez Lajonchere Juan Morales Julio César Morán Álvarez Lázaro J Lorenzo

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