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刘鹏展

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NT-proBNP 特异性单克隆抗体的制备及鉴定

刘鹏展 Pengzhan Liu 黄绮玲 Huang Qi-ling 何小伟

旨在制备并鉴定抗人NT-proBNP 特异性单克隆抗体。采用重组NT-proBNP 蛋白免疫Balb/c 小鼠，取血清效价高的脾细胞与SP2/0 细胞融合，经HAT 筛选和有限稀释法亚克隆，获得阳性杂交瘤细胞株，用动物体内诱生法制备腹水，用正辛酸-硫酸铵沉淀法将抗体纯化，并测定抗体的亚类、效价、特异性及相对亲和力。结果表明，获得4 株能稳定分泌抗人NT-proBNP 单克隆抗体的阳性杂交瘤细胞株，分别命名为1G12、1B2、3D5 和2D11。抗体Ⅰg 亚类，1G12 和1B2 为ⅠgG2a 型，2D11 为ⅠgG1 型，3D5 为ⅠgG2b 型；1G12，1B2 和3D5 的抗体效价达到106，而2D11 的效价仅达104。特异性好，1G12、1B2、3D5 和2D11 四株抗体的亲和常数依次为9.32×1011、1.07×1012、2.31×1012 和6.33×1010。成功制备了特异性抗人NT-proBNP 单克隆抗体。

10.13560/j.cnki.biotech.bull.1985.2016.06.021

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