目的探讨基质金属蛋白酶-9（MMP-9）血清水平及其基因1562C／T多态性与儿童哮喘的相关关系。方法采用双抗体夹心酶联免疫吸附试验（SELISA）测定65例哮喘儿童（病例组）和68名健康对照儿童（对照组）血清MMP-9水平，并采用多聚酶链反应-限制性片段长度多态性（PCR-RFLP）分析技术检测MMP-9基因-1562C／T多态性。结果病例组儿童MMP9血清水平（136．53±29．96）ng／mL明显高于对照组儿童[（45．08±12．53）ng／mI。]（P〈0．05）。病例组和对照组MMP9基因-1562的CC、CT、TT基因型构成比分别为67．7％、29．2％、3．1％和73．5％、25．0％、1．5％，其C和T基因频率分别为82．3％、17．7％和86．0％％、14．0％，两组的基因型和基因频率差异均无统计学意义（P〉0．05）。病例组和对照组中不同基因型儿童的MMP9血清水平差异均无统计学意义（P〉0．05）。结论MMP9血清水平与儿童哮喘的发生、发展相关，而MMP-9基因-1562C／T的多态性与儿童哮喘发病无关。

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乳胶过敏原Hev b 3的克隆表达和纯化及其过敏原性检测

海南医学院学报 (2003)

谭光宏黄风迎郑少江罗凌青钟江华

目的：克隆乳胶主要过敏原Hev b3基因，构建其原核表达裁体并表达和纯化重组蛋白，了解重组的Hev b3是否具有和相应IgE特异结合的过敏原特性。方法：用RT—PCR方法从新鲜海南橡胶树叶提取的总RNA中扩增出Hev b3的cDNA，将其克隆于原核表达载体pQE30质粒，转化大肠杆菌XL1-Blue，酶切和测序验证构建的载体，利用Ni—NTA柱层析纯化重组蛋白并用SDS—PAGE和Western Blot验证。结果：酶切和测序结果证实克隆了正确的Hev b3序列，重组表达并纯化的蛋白具有和特异IgE抗体结合的过敏原特性。结论：成功构建了乳胶主要过敏原的原核表达载体，并纯化了具有过敏原特性的重组蛋白，为过敏原的标准化创造了条件。

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108例支气管哮喘患者MMP-9和TIMP-1血清水平变化及相关性分析

重庆医学 (2011)

朱洪覃西彭江龙谭光宏

目的探讨支气管哮喘（哮喘）患者MMP-9和TIMP-1血清水平变化及其相关关系。方法采用酶联免疫吸附测定（ELISA）检测52例急性哮喘患者（急性组）、56例慢性哮喘患者（慢性组）和来自同期海南医学院附属医院健康体检中心的60名健康对照者（对照组）的MMP-9和TIMP-1血清水平,并对结果进行相关分析。结果急性组、慢性组与对照组比较,MMP-9和TIMP-1血清水平明显增高（P〈0.05）。MMP-9与TIMP-1血清水平存在明显的相关关系（r=0.632,P〈0.05）。结论 MMP-9与TIMP-1关系密切,并且参与了气道重塑的过程,其血清水平对哮喘的病情评估具有指导意义。

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超氧化物歧化酶（Val16Ala）基因的克隆及其真核表达载体的构建

海南医学 (2012)

Wang Shi Hua 王九辉谭光宏

目的获得锰超氧化物歧化酶（MnSOD）基因并进行Vall6Ala（GTT＋GcT）位点的定点突变，构建MnSOD（Val）及MnSOD（Ala）基因的真核表达载体。方法采用RT-PCR法从人乳腺癌细胞MCF-7中扩增MnSOD（Val）基因；PCR引物延伸法对Vall6Ala进行定点突变以获得MnSOD（AIa）基因；通过胁RI＋XhoI双酶切PCR产物与相应质粒pEGFP-NI连接构建两基因的真核表达载体pEGFP-N1一MnSOD（Val）和pEGFP-N1-MnSOD（AIa）。结果突变位点经测序证明正确，重组质粒经双酶切及测序鉴定证明正确。结论本实验成功薪得了MnSOD（Val）及MnSOD（Ala）基因并成功构律了两基因的真核表达载体。

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HIV-1 Tat基因在pEGx-KG中的融合构建及原核表达

陈凡周菁章晓联谭光宏林映莹

Objective: To study the efficient expression of GST-Tat protein in Escherichia coli BZ21 (DE3). Methods: HIV-l Tat gene was amplified by PCR from cDNA library of HIV and was inserted into vector of pEGx-KG. The recombinant plasmid was transferred and expressed in E. coli BL21 (DE3). The expressed products were identified by SDS-page and Western-blot. Results: HIV-1 Tat gene was amplified successfully by PCR. The recombinant plasmid was expressed efficiently in E. coli (BL21). SDS-page and Western-blot analyses showed the expressed Tat fusion protein with relative molecular weight was 38.9 kDa. Conclusion: HIV-1 Tat gene can be cloned and GST-Tat fusion protein can be expressed efficiently in E. coli, which may contribute to further research of anti-AIDS.

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